近年来,随着分子生物学的发展和检测水平的提高,许多检测方法都可直接从临床粪便样本中进行靶标检测,其中qPCR检测已成为先进的胃肠病学常规诊断方法,一方面可用于常规病原体(细菌、病毒、寄生虫等)的检测,另一方面也可用于肿瘤筛查,对肿瘤相关原癌基因、抑癌基因表达水平进行实时检测,或对相关表观遗传学修饰如甲基化修饰等进行监测。
2×Stool Direct RT Premix-UNG(Probe qRT-PCR)
50℃ 15min; 95℃ 1min; 50cycles(95℃ 15s, 56℃ 45s)
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1
测试:人总RNA扩增
模板:粪便样本背景的人总RNA
注:以上扩增图中,VIC和ROX通道扩增Ct值随粪便加样增加而增大,扩增Rn值随粪便加样增加而降低。
结论:宝锐生物MD2124对粪便样本的耐受性比同类产品更强
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2
测试:肠道病毒CA16检测
模板:粪便样本背景的CA16病毒核酸
粪便样本处理:取0.2 g粪便样本加入1 mL TE Buffer中,充分混匀液化;瞬时离心后取上清,得到20%粪便样本,经无菌水稀释后得到0.5%和1%粪便样本;采用以上两种浓度的粪便样本稀释CA16模板;然后按20%加样量直接加入反应体系进行扩增。
注:以上扩增图中,Supplier M的产品,随着粪便背景的提高,Ct值增大,Rn值下降,而Biori产品,靶标扩增不受粪便背景加量干扰,表现出更强的抗抑制性。
结论:宝锐生物MD2124对粪便样本的耐受性比同类产品更强
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3
测试:粪便RT直扩可冻干体系加速稳定性测试(55℃加速30d)
模板:粪便样本背景的人总RNA
左图1:粪便直扩体系冻干后形态
右图2:粪便直扩体系冻干后55℃加速30d形态
结论:宝锐生物FMD5124,55℃30d加速稳定性检测合格
Stool Direct RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR)是专用于免除粪便样品的核酸提取纯化步骤,直接进行靶基因荧光定量(探针法)RNA扩增检测的专用试剂。本品有很强的抑制物耐受性,可简化粪便样本的检测流程,同时能够保持样本的质量和完整性。
如果您正在从事粪便样本中RNA病原体或病变物质的单重或多重检测,如果您有无创、便捷、快速的粪便核酸检测的需求,欢迎试用宝锐生物粪便直扩试剂Stool Direct RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR)。
货号:FMD5124