前言
POCT,即时检验(point-of-care testing),作为IVD(体外诊断)最重要的细分领域之一,近年来备受关注。POCT技术平台迭代快速,对检测的快速、简便、精准的追求也越来越高。伴随非洲猪瘟、新冠疫情的反复来袭,越来越多行业标杆企业开始进行资源整合,以达到核酸检测的POCT化。宝锐生物推出的直扩试剂,打破传统核酸检测的模式,无需核酸提取纯化过程,为“样本进,结果出”的检测模式提供试剂原料保障。
宝锐
直扩试剂
稳定/灵敏/简便/兼容
传统的PCR反应需要以高质量的核酸为模板进行反应,如模板中有样本抑制物或提取试剂组分残留时就会抑制PCR反应的顺利进行。而宝锐生物推出的用于PCR直扩的核酸检测试剂含有创新型的独特配方,可对生物样本进行原位裂解、扩增,并保证结果的准确性。此技术大大降低了劳动强度,节约了人力成本和实验资源,提高了检测效率。
免提取 可冻干
全过程无加热、无核酸提取纯化。样本可直接作为模板上样进行qPCR检测,即混即用;可提供常规型/可冻干型/防污染体系配方,规格支持个性化定制。
广泛适用 兼容性强
DNA/RNA均可进行直扩检测,兼容市面上常规荧光定量PCR仪器及快速荧光定量PCR仪。
RNA直扩试剂
HCV血浆直扩测试
扩增结果:
Ct值统计:
小结
1. 由每孔的当量模板量来计算,2.61×10⁴ IU/mL HCV磁珠提取模板理论上应比对应血浆模板直接扩增提前2.17个Ct值,实际提前2.4,即,两种模板扩增效果相当。可见,宝锐RNA直扩试剂对血浆样本耐受性良好。
2. 相同模板浓度的HCV阳性血浆,市场同类产品M扩增Ct值较宝锐直扩试剂滞后4.27,即宝锐试剂扩增效率明显高于市场同类产品M。
细胞直扩测试
细胞样本处理方式:取细胞培养物1000rpm离心10min,去除上清后加入1×TE Buffer重悬,并进行梯度稀释,即可获得待测样本。
扩增结果:
Ct值统计:
小结
1. 宝锐直扩试剂对梯度加量的培养细胞扩增Ct值梯度正确,不同梯度模板扩增曲线Rn值相当,可以达到相同的平台期;
2. 市场同类产品M对中低浓度模板加量的扩增和宝锐直扩试剂相当,而高浓度模板扩增曲线Rn值下降,Ct值明显滞后,可能是受到抑制;
3. 宝锐直扩试剂对培养细胞耐受性较市场同类产品M更好,扩增效果更优。
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