前言
直接PCR（Direct PCR）是一种不经核酸提取而直接对生物样本进行扩增的反应，是目前分子诊断领域的热门技术之一。与常规PCR的主要区别在于，样本可不经过核酸抽提，直接进行PCR反应，因此对于参与直接PCR反应的酶的耐受性和buffer的兼容性有较高的要求
宝锐
直扩试剂
稳定/灵敏/简便/兼容
传统的PCR反应需要以高质量的核酸为模板进行反应，如模板中有样本抑制物或提取试剂组分残留时就会抑制PCR反应的顺利进行。而宝锐生物推出的用于PCR直扩的核酸检测试剂含有创新型的独特配方，可对生物样本进行原位裂解、扩增，并保证结果的准确性。此技术大大降低了劳动强度，节约了人力成本和实验资源，提高了检测效率。
免提取 可冻干
全过程无加热、无核酸提取纯化。样本可直接作为模板上样进行qPCR检测，即混即用；可提供常规型/可冻干型/防污染体系配方，规格支持个性化定制。
更稳定 灵敏度高
HBV血浆/血清样本最低检测限为30IU/mL。
广泛适用 兼容性强
DNA/RNA均可进行直扩检测，兼容市面上常规荧光定量PCR仪器及快速荧光定量PCR仪
DNA直扩试剂
货号：MD2091
2×SensiDirect Premix-UNG (Probe qPCR)
2×SensiDirect Premix Buffer(dUTP) 50×SensiDirect Enzyme/UNG Mix
测试报告
测试一
1. DNA直扩试剂（MD2091）进行HBV、内标基因双重检测；
2. 分别对比测试纯化模板、血浆模板和血清模板。
1. 实验方法
HBV纯化模板的加量为10µL/T（25µL反应体系），血浆模板和血清模板的加量为6.25µL/T（25µL反应体系）。
扩增程序
SLAN-96P：50℃ 2min；95℃ 5min；50 Cycles（95℃ 10s，55℃ 40s）。
2. 实验结果
扩增曲线
Ct值统计
结果分析
1. HBV血浆和HBV血清样本扩增效果相当。
2. 从Ct值上看，HBV纯模板扩增较HBV血浆或血清模板提前，但由每孔的当量模板量来计算，HBV纯模板扩增效率与HBV血浆或血清模板相当。
测试二
DNA直扩试剂（MD2091）测试HBV血浆模板的线性范围，评价试剂扩增效率。
1. 实验方法
HBV血浆模板设置：1.6×10⁷IU/mL，2T；1.6×10⁶IU/mL，2T；1.6×10⁵IU/mL，2T；1.6×10⁴IU/mL，2T；1.6×10³IU/mL，2T；
加样量：6.25µL/T（25µL体系）。
扩增程序
SLAN-96P：50℃ 2min；95℃ 5min；50 Cycles（95℃ 10s，55℃ 40s）。
2. 实验结果
扩增曲线
Fam通道标准曲线：
Ct值统计
结果分析
标准曲线相关系数-0.99967，相关性良好，结果可靠。试剂扩增效率99.045%，表示HBV血浆各浓度梯度的复孔重复性好、不同浓度的模板扩增效率较为一致，实验结果稳定可靠、可重复性好。
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本系列未完待续，下期更精彩！
